【案例分享】东富龙层析助力胶原蛋白规模化量产

引言

胶原蛋白在医疗器械、医用敷料及高端护肤等领域应用前景广阔，市场对高纯度、高活性胶原蛋白的需求持续增长。东富龙（300171）层析介质以高动态载量、优异的化学稳定性与规模化流穿性能为核心优势，为客户提供从工艺开发、中试放大到吨级生产的完整纯化解决方案。截至目前，东富龙层析介质已协助客户完成多个重组胶原蛋白项目的工艺开发，包括支持客户完成2吨级规模化生产、实现5吨级产线落地等项目，其余多个项目均已进入中试乃至规模化生产阶段，覆盖三类医疗器械、医用敷料及化妆品等多类应用标准。

东富龙层析介质不仅为客户实现纯度高、宿主残留低、批次稳定的高质量生产目标，更通过持续的技术协同与工艺优化，助力企业提升产品竞争力、加速产业化进程，持续推动胶原蛋白行业向规范化、规模化与高附加值方向发展。胶原蛋白纯化工艺耗材解决方案可回顾推文：【东东工艺指南】胶原蛋白纯化（上）；【东东工艺指南】胶原蛋白纯化（下）。

【资料图】

胶原蛋白纯化商业化案例分享

动物组织来源胶原蛋白

本案例为动物组织中提取并纯化胶原蛋白，采用东富龙TanFlux Ⅱ微滤膜包进行澄清过滤去除杂质，CM Purose 6FF阳离子交换层析进行精细纯化，层析图谱显示，目标蛋白在洗脱峰中富集效果显著，流穿部分中目标蛋白含量较低。最后采用东富龙TanFlux Ⅱ超滤膜包进行料液浓缩与脱盐，实现了从复杂动物组织提取液中高效纯化胶原蛋白。最终产物纯度较高，工艺步骤简洁，具备良好的可放大性和生产适用性，适用于动物源胶原蛋白的规模化制备。

图1. CM Purose 6FF层析图谱（左）；SDS-PAGE纯度图（右）

表1. CM Purose 6FF产品信息

谷氨酸棒状杆菌表达-Ⅲ型胶原蛋白（His 标签）

该案例为谷氨酸棒状杆菌表达系统表达的胶原蛋白，蛋白由谷氨酸棒状杆菌分泌至胞外发酵液中，简化了下游纯化的初始步骤。料液离心澄清后，精纯步骤采用 Ni Purose 6FF镍离子螯合亲和层析介质进行高效纯化，该介质具有镍离子泄漏量低、性能稳定、动态结合容量高的特点，确保了工艺在规模化生产中的稳定性与经济性。终产品HPLC纯度图显示最终产品纯度96.73%、收率80%，满足工业化生产对重组III型胶原蛋白纯度、收率与安全性的要求。

图2. Ni Purose 6FF层析图谱

图3. 终产品HPLC纯度图（左）；

终产品SDS-PAGE纯度图（右）

表2. Ni Purose 6FF 产品信息

毕赤酵母表达-Ⅲ型胶原蛋白

该案例为毕赤酵母表达系统表达的胶原蛋白，目标蛋白由毕赤酵母分泌表达至发酵上清中，有利于下游纯化的初步处理。料液经过澄清、超滤浓缩处理后，采用Phenyl Purose 6FF（HS）高载量苯基疏水层析介质进行精纯。该介质具有高动态结合载量、良好的化学稳定性与机械强度，适合规模化生产。层析图谱显示，在约60%洗脱条件下目标蛋白被有效洗脱，与约10%洗杂峰分离明显，终产品HPLC纯度图显示最终产品纯度96.4%，收率65%，满足工业化生产需求。

图4. Phenyl Purose 6FF(HS) 层析图谱

图5. 终产品HPLC纯度图（左）；

终产品SDS-PAGE纯度图（右）

表3. Phenyl Purose 6FF(HS) 产品信息

CHO表达全长三螺旋III型胶原蛋白

该案例为CHO表达系统表达的难溶性三螺旋胶原蛋白，料液经过澄清处理后，在pH 3条件下使用SP Purose 6FF进行阳离子交换层析，该介质载量高、稳定性强、流速快、使用寿命长，适用于蛋白的早期捕获与粗纯，在规模化生产中具有明显的效率与经济性优势。数据显示，不同洗脱组分（S2、S4、S6）均获得高纯度产品，其中纯化效果最好的S2产量高、纯度高达99.23%，SP Purose 6FF能够稳定地将目标蛋白与杂质分离，满足规模化生产要求。

图6. 不同组分终产品HPLC纯度图

表4. SP Purose 6FF 产品信息

结语

东富龙层析介质在多类型胶原蛋白的纯化工艺中表现卓越，充分展现了其在生物制药下游纯化领域的技术实力与产品可靠性。无论是动物组织来源的天然胶原蛋白，还是通过微生物或哺乳动物细胞表达的重组胶原蛋白，东富龙提供的多系列层析介质均能针对不同胶原蛋白的理化特性，实现高效捕获、精细分离与高回收率纯化。未来，东富龙层析介质将针对复杂结构蛋白、融合蛋白等特殊产物开发新一代高性能层析介质，进一步打破进口依赖，为国内生物制药企业提供性能相当、供应稳定、成本优化的国产层析介质选择。